Biotinyl-Magainin 2 ;Bio-GIGKFLHSAKKFGKAFVGEIMNS

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Biotinyl-Magainin 2 ;Bio-GIGKFLHSAKKFGKAFVGEIMNS

一、基础信息

  • 中文名称:N 端生物素修饰 Magainin 2(蛙皮肤抗菌肽)
  • 英文全称:Biotinyl-Magainin 2
  • 三字母序列:Biotin-Gly-Ile-Gly-Lys-Phe-Leu-His-Ser-Ala-Lys-Lys-Phe-Gly-Lys-Ala-Phe-Val-Gly-Glu-Ile-Met-Asn-Ser
  • 单字母序列Bio-GIGKFLHSAKKFGKAFVGEIMNS
  • 氨基酸总数:23 aa
  • 分子式:C114H180N30O29S
  • 分子量:2466.94
  • 结构修饰说明:
  1. N 端共价修饰生物素(Biotin / Bio,生物素酰基);
  2. 线性直链多肽,C 端游离羧基,无酰胺、二硫键、环化、焦谷氨酸、乙酰修饰;
  3. 无侧链定点修饰。
  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:含多处 Phe、Met,280 nm 紫外吸收明显,可直接紫外分光光度法定量。

2.稳定性要点

  • 含 Met,极易氧化失活;配液、分装全程冰浴,减少空气暴露;长期冻干粉充氮气隔氧保存;
  • Phe 为光敏残基,配制、储存全程避光;
  • 无 Pro,肽链柔性高;仅 N 端生物素封闭氨基端,C 端游离易被羧肽酶、内肽酶剪切,工作液现配现用。

3.酸碱特性
酸性残基:Glu;碱性残基:Lys、His;整体呈强阳离子型;适配 pH 6.0–7.4 PBS、细菌 / 真核细胞培养液,低盐环境更利于其膜结合活性。

4.溶解性
Ser、Asn 亲水残基搭配大量正电 Lys,水溶性极佳,中性缓冲液常温完全溶解;高盐条件下溶解度下降。

5.空间构象
水溶液中以无规卷曲为主,接触细胞膜磷脂后快速形成两亲 α 螺旋;螺旋结构是穿透细菌细胞膜的核心功能区;N 端生物素远离膜结合区域,不破坏抗菌活性与膜结合能力。

三、来源背景

Magainin 2 是非洲爪蟾皮肤分泌的天然阳离子抗菌肽,广谱抗细菌、真菌、原虫;N 端偶联生物素作为亲和探针,用于多肽 - 细胞膜互作、膜蛋白结合捕获实验。

四、生物学功能

  1. 广谱抗菌:靶向破坏革兰氏阳性 / 阴性菌细胞膜,致膜穿孔、菌体裂解;同时抑制真菌、寄生虫;
  2. 低哺乳动物细胞毒性,选择性作用于微生物膜;
  3. 轻度免疫调节,诱导炎症因子释放;
  4. 生物素标签结合链霉亲和素,Pull-down 富集细胞膜脂质 / 膜结合蛋白,可视化示踪多肽在细胞表面定位。

五、科研应用

  1. Pull-down 实验筛选细胞膜上与 Magainin 2 结合的脂质 / 膜蛋白;
  2. 抗菌肽作用机制、膜穿透动力学荧光示踪;
  3. 新型抗菌药物体外筛选、构效关系研究;
  4. 细菌、真菌体外抑菌杀菌功能模型;
  5. 阳离子抗菌肽细胞选择性、溶血活性对比实验。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌低盐 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间防止 Met 氧化;避免高盐缓冲液;
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3–5 天。