生物素标记熊去氧胆酸Biotin-UDCA,Biotin-Ursodeoxycholic Acid的合成路线

📅 2026/8/4 3:35:22 👁️ 阅读次数 📝 编程学习
生物素标记熊去氧胆酸Biotin-UDCA,Biotin-Ursodeoxycholic Acid的合成路线

生物素-熊去氧胆酸(Biotin-UDCA)是一种将生物素(Biotin,又称维生素B7)与熊去氧胆酸(UDCA)通过化学手段共价偶联而成的功能化小分子探针。熊去氧胆酸是一种在人体内天然存在的亲水性胆汁酸,具有保肝、利胆及溶解胆固醇结石等药理作用。

核心特性与优势

  1. 特异性识别与高亲和力捕获:生物素端保留了与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)发生特异性结合的能力。利用生物素-亲和素系统,研究人员可对熊去氧胆酸进行高灵敏度的检测、亲和纯化富集或实现荧光/酶促信号放大。
  2. 保留胆汁酸的生物学功能:该偶联试剂保留了熊去氧胆酸作为亲水性胆汁酸的核心结构特征,可用于探究其在细胞内的分布、定位和行为,以及研究其替代毒性胆酸、保护肝细胞膜的分子机制。
  3. 理化性质与溶解性:该化合物外观通常为固体或粉末,纯度可达95%以上。它具有良好的溶解性,可溶于DMSO、DMF、DCM等有机溶剂,同时也溶于水,便于在多种实验条件下开展研究。

合成路径

  1. 活化步骤:将熊去氧胆酸的羧基用EDC/NHS体系活化,生成熊去氧胆酸-NHS活性酯,在无水二氯甲烷体系中室温搅拌反应2小时。
  2. 偶联步骤:向体系中加入氨基修饰的生物素,滴加三乙胺调节pH至7.5-8.0,室温避光反应12小时完成共价连接。
  3. 纯化步骤:反应液经水洗、无水硫酸钠干燥后,通过硅胶柱层析分离,收集目标组分旋干得到终产物,全程控制温度避免熊去氧胆酸结构降解。

主要科研方向

Pull-down + LC-MS/MS 互作蛋白筛选

SPR / BLI 亲和力定量

荧光光谱竞争结合实验(并行筛选阵列)

细胞荧光示踪、体外受体结合功能验证

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