Kemptide (Phosphate Acceptor Peptide);LRRASLG

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Kemptide (Phosphate Acceptor Peptide);LRRASLG

一、基础信息

多肽名称:Kemptide,Phosphate Acceptor Peptide
中文名称:肯普肽、磷酸受体肽、PKA 底物标准肽
三字母序列:Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly
单字母序列LRRASLG
氨基酸数量:7 aa
结构修饰:线性无修饰短肽,无 Cys、Met,无二硫键、无环化

结构式

二、理化性质

  • 分子式C32H61N13O9
  • 分子量771.92 Da
  • 等电点 pI10.85强碱性多肽
  • 紫外吸收:无 Tyr、Trp、Phe,280 nm 无紫外吸收
  • 溶解性:碱性强、极性残基丰富,极易溶于纯水、PBS、弱酸缓冲液
  • 聚集特性:短肽结构、电荷排斥强,完全无寡聚倾向,始终稳定单体
  • 稳定性:无氧化敏感残基,冻干及溶液状态都高度稳定

三、序列结构解析

  1. 双碱性识别基序 Leu-Arg-Arg
    连续 Arg-Arg 是PKA(蛋白激酶 A)经典识别位点,强正电荷是激酶特异性结合的核心;
    Leu 疏水侧翼辅助激酶口袋匹配。
  2. 磷酸化位点 Ala-Ser
    中间Ser 丝氨酸唯一磷酸化受体位点
    PKA 可特异性催化该 Ser 羟基发生磷酸化,是整个肽的功能核心。
  3. C 端疏水柔性尾 Leu-Gly
    Leu 提供微弱疏水匹配;Gly 高柔性,无空间位阻,利于激酶对接与催化反应。

四、作用机制与核心功能

  1. 经典 PKA 特异性底物
    Kemptide 是科研公认的蛋白激酶 A 标准底物肽
    体外可被 PKA 特异性磷酸化,活性专一、背景极低。
  2. 磷酸化检测标准工具
    作为磷酸受体肽,用于激酶活性检测、酶动力学分析、IC50 测定。
  3. 激酶抑制剂筛选模型
    常用于筛选 PKA 特异性抑制剂、评价化合物对激酶活性的抑制效果。
  4. 信号通路机制研究
    作为经典对照底物,用于 cAMP/PKA 信号通路体外酶活实验。

五、科研应用

  • PKA 酶活性测定、酶动力学、米氏常数 Km 检测;
  • 化合物高通量筛选、PKA 抑制剂药效评价;
  • 蛋白激酶磷酸化机制、底物识别基序研究;
  • 生化教学及实验室标准激酶底物对照肽。

六、溶解与储存使用

  1. 溶解:强碱性肽,直接用超纯水或中性 PBS 即可快速全溶,溶液澄清;
  2. 无寡聚、无氧化风险,常温短时操作稳定;
  3. 冻干:-20℃避光密封,长期 -80℃;
  4. 溶液分装,避免反复冻融,可长期保持底物活性不变。